柱色谱分离常识

发布时间： 2019-05-13

• 纯化方法的选择

1. 少量的时候(小于0.5 g), 请考虑使用制备TLC纯化,方便且快速.

2. 大量且不容易纯化的时候, 请先尝试重结晶.

3. 请务必在化合物极性小的步骤过柱, 这个时候过柱产物更容易纯化.

4. 如果不影响反应, 可以尝试不纯化, 粗品直接往下做. 也可尝试加保护基, 降低纯化难度.

• 柱子的选择

1. 加压柱：适合小于100-200 g产品的纯化。大尺寸的加压柱难以制作，用起来危险性大。在公司过柱时，请使用双链球加压

2. 减压柱：适合任何量的过柱, 比加压柱快，需要减小流动相极性过柱(比加压柱小一倍), 不然会导致分离效果差。

3. 常压柱：适合大于50-100 g的产品. 常压柱是分离效果最好的，但是时间也最长。

• 过柱最重要两要素

只要选择好柱子尺寸和流动相, 过柱基本上没有很大问题,即使有少量气泡, 即使有少量裂纹, 对过柱影响也非常小

• 柱子尺寸

1. 选柱子总的原则：选择稍粗长的柱子。

2. 硅胶量的控制：10 g产品, 10-20 g硅胶拌样, 100-300g 硅胶上柱. 样品层和硅胶层的比例控制大于10:1。

• 流动相的选择

1. 流动相的配合：常用石油醚配乙酸乙酯，二氯甲烷配甲醇。特殊情况有使用苯，甲苯过柱的情况。

2. 流动相的选择方法: 在TLC板上Rf=0.2-0.3的极性过柱。杂质点以5-X (X指杂质点和所要点相差的Rf值) 倍过柱。

3. 流动相选择的注意事项: 过柱时梯度洗脱, 减少过柱时间和浪费溶剂. 常用的是200-300目硅胶, 容易过的产品用100-200目硅胶, 过柱速度更快; 较少用300-400目硅胶。

• 装柱

1. 干法装柱：把干硅胶倒入柱子，然后在下面接上水泵真空把柱子抽5-10分钟，然后加样用石油醚等低极性淋洗一遍。实践证明挺好用.

2. 湿法装柱适用于常压柱：直接常用石油醚混合硅胶装柱.

• 上样

1. 干法上样：常用低沸点溶剂(如二氯甲烷）溶解产品, 加1-2倍重量于样品的硅胶量拌样, 旋干. 要保证在旋干后,不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上)。

2. 湿法上样: 直接湿法上样适合液体不粘稠, 所使用的溶剂溶解样品时越少越好, 不然溶剂就成了淋洗剂了, 间接湿法上样适合范围广, 特别推荐。

• 特殊样品

1. 敏感化合物可以尝试氧化铝充填过柱（比如醛, 容易开环的化合物）效果不错. 缺点是氧化铝的吸附能力稍差。需要降低流动相极性2-5倍。

2. 容易掉Boc基团的化合物, 请用三乙胺碱化硅胶柱子后再过柱。

3. 酸性化合物加1/1000 醋酸, 碱性化合物加1/1000-1/100氨水或者三乙胺或氨甲醇。

• 注意事项

1. 做好过柱前的基础工作(100%确认哪个点是要的)

2. 做好过柱和开反应的矛盾：统筹安排好过柱和开反应，提高工作效率

3. 实在分不开，可以尝试粗品往下做，或者加保护基团